凝胶层析是一种基于分子大小分离蛋白质或其他大分子的技术。其基本原理是利用含有孔洞的凝胶珠，这些孔洞的大小是固定的。当混合物通过凝胶层析柱时，分子会根据其大小与凝胶珠发生相互作用。较小的分子能够进入凝胶珠的孔洞内部，而较大的分子则无法进入，只能沿着柱子外部流动。
因此，最先流出的实际上是那些最容易被凝胶孔吸附的小分子物质。它们因为无法进入凝胶珠的孔洞，所以会迅速通过柱子，最先被收集到。而较大的分子则因为无法被吸附，会沿着柱子缓慢移动，最后流出。
凝胶层析的应用非常广泛，特别是在生物化学和分子生物学领域。它不仅可以用于分离和纯化蛋白质，还可以用于测定蛋白质的分子量。通过凝胶层析，我们可以得到关于分子大小和相互作用的重要信息，这些信息对于理解生物分子的功能和特性至关重要。