一、实验目的
了解层析技术的基本原理，学习并掌握纸层析的方法和原理，通过实践学会分析未知样品中的氨基酸成分。
二、实验原理简述
层析法，也称作色谱法，是一种根据混合物中各组分的物理、化学及生物学特性差异进行分离的方法。在层析过程中，固定相和流动相是两个核心要素。固定相可以是固体或液体，如吸附剂、凝胶、离子交换剂等，它们能与待分离的化合物进行可逆的吸附、溶解、交换等作用。流动相则是推动固定相上待分离物质移动的液体、气体或超临界体。纸层析则是以滤纸作为支持物的分配层析，通过有机溶剂在滤纸纤维上的抽提作用实现物质的分离。氨基酸的显色反应——茚三酮反应也是本实验的重要原理。几乎所有-氨基酸及蛋白质都能与茚三酮反应生成蓝紫色物质，但脯氨酸、羟脯氨酸等例外。
三、实验器材介绍
本次实验所需器材包括大试管及塞子、大头针、三角薄层喷瓶、毛细管、吹风机、层析滤纸（新华一号）、分液漏斗等。
四、实验材料与试剂
实验材料包括扩展剂（由水饱和的正丁醇和醋酸混合制成）、氨基酸混合液（含有赖氨酸、脯氨酸、亮氨酸等）以及显色剂（0.1%水合茚三铜正丁醇溶液）。
五、实验操作过程
1. 取一条层析滤纸，在纸的一端划一直线作为原点，并在此中点处点样。
2. 在大试管中加入扩展剂，使扩展剂的液面处于原点到纸底的中间位置。
3. 将点好样的滤纸悬挂于大试管中，使点样端浸入扩展剂约1.5cm。等待溶剂上升后取出滤纸，风干。
4. 使用三角薄层喷瓶均匀喷洒显色剂于风干后的滤纸条上，再次风干。
5. 根据显现的层析斑点计算各种氨基酸的Rf值。
六、实验注意事项
1. 为避免滤纸受到污染，操作时建议带手套。
2. 在重复点样时，可使用吹风机的冷风加速样品干燥；而在喷洒茚三酮后，应使用热风吹干滤纸以加快显色过程。
通过以上实验，我们不仅可以深入理解层析技术的基本原理，还可以学会实际操作纸层析法并分析样品中的氨基酸成分，为后续的科研或实验工作打下坚实的基础。
