想要快速准确地计算菌落形成单位(CFU),其实非常简单,只要按照以下三步操作,即使是完全没有微生物实验经验的小白也能轻松掌握。
第一步:准备菌液稀释
首先,你需要将待测样本进行系列稀释。比如取1毫升样本加入9毫升无菌水中,混匀后得到10倍稀释液。继续取1毫升新稀释液加入9毫升无菌水中,如此重复数次,得到不同浓度的稀释液。记住每个稀释液的倍数,这是后续计算的关键。
第二步:涂布平板
选择一个合适的稀释液(通常是10⁴到10⁶倍稀释液),取100微升滴加到无菌平皿中,再加入冷却后的无菌琼脂培养基,快速混匀并均匀摊开。每个稀释液至少做两个平行皿,确保结果可靠。然后放入培养箱中,在37℃恒温培养24-48小时。
第三步:计数菌落
菌落长出后,选择菌落数在30-300之间的平板进行计数。数菌落数时,按照每皿菌落数乘以稀释倍数再除以涂布体积(如100微升),即可得到每毫升样本中的CFU值。例如,一个稀释10⁵倍的平板计数为150个菌落,则CFU = 150 × 10⁵ ÷ 0.1 = 1.5×10⁸ CFU/mL。
只要严格按这三步操作,即使是新手也能快速准确地计算出样本中的菌落数量。